有人提出抑制压力相关的情绪反应，会导致同时激活自主神经系统（ANS）的交感神经和副交感神经系统，并且这些情绪状态的表达对溃疡形成具有保护作用。本研究旨在研究大鼠压力引起的磨牙症活动（SBA）。评估应激期间咀嚼肌EMG活动和SBA的生理影响，例如各种组织和器官应激引起的变化。

材料和方法

动物

       在控制温度（22±3℃）和照明条件（12:12小时光照：黑暗循环）下，将35只雄性Wistar大鼠（7-8周龄）分组饲养（每笼5只），提供食物和水。为了避免昼夜变化带来的激素变化对细胞因子表达的影响，我们在1000-1500小时之间进行了所有实验。

约束应激和SBA测量

       通过将大鼠仰卧位固定在木板（18×25cm）上形成约束应激（20只大鼠）。四条腿都用胶带固定在身体中线45°的方向。实验组大鼠暴露于约束应激360分钟。对照组大鼠没有暴露于约束条件，且能够自由获取食物和水（15只大鼠）。

        为了记录SBA的长度，将针状电极直接插入双侧咬肌以供EMG（EMG，SN700，Tecno Science，Tokyo，Japan）记录。肌电图显示肌肉活动; 我们测量了SBA的持续时间。

标本的制备

       在360分钟的约束后，在全身麻醉下通过心脏穿刺抽血。取血样并在室温下凝结10分钟，然后离心以获得血清样品。立即储存等分的血清并在-80℃下冷冻直至使用。取出脾脏和胸腺并称重（湿重），然后在10％福尔马林溶液中浸泡固定，随后进行组织学切片以观察组织学变化。胃也被移除以评估溃疡形成。

测量胃部病变

       沿着大弯将胃剖开，并作为新鲜标本固定在纸板上。在新鲜时，通过解剖显微镜评估胃损伤的严重程度。评分包括发红区域的数量和累积长度以及充满凝血的离散腺体病变。我们还使用视觉分析系统（WinRoof，5.5版，日本东京都三谷商事;图1）测量了胃粘膜的发红区域（RAS）。记录每只动物最不发白以及胃粘膜表面红润部分的不同颜色值（即红色，绿色和蓝色）。通过最发白区域值减去最发红区域值来计算截止值。这种差异被分成两半，并加到最高的红色值。然后，粘膜表面的红色区域被视为RAS。在RAS可视化之后，将胃浸入10％福尔马林溶液中，然后进行组织学切片以观察组织学变化。

测量血液肾上腺素和皮质醇水平

       分析血清样品以评估肾上腺素和皮质醇水平。皮质醇水平用皮质醇放射免疫测定法（RIA）试剂盒（Immunotech，USA），使用如前所述的抗皮质醇小鼠单克隆抗体测定。

       用高效液相色谱法分离儿茶酚胺（特别是血中的肾上腺素）。样品通过阳离子交换预柱通过以除去水溶性物质，然后使用HLC-8030柱（Toso，Tokyo，Japan）分离儿茶酚胺。之后，测量由二苯基乙二胺和铁氰化钾产生的荧光，其中激发波长λex= 355nm，发射波长λem= 470nm。

测量血液白细胞

       血液白细胞，特别是中性粒细胞与淋巴细胞的比例，是交感神经系统免疫应激反应的指标。对于白细胞部分，通过外周血涂片（Wright-Giemsa染色）和显微镜细胞计数评估嗜中性粒细胞，淋巴细胞，单核细胞和嗜碱性粒细胞。计算白细胞部分中嗜中性粒细胞和淋巴细胞的比例。

结果

SBA

       约束应激动物显示出一定长度的SBA，非应激动物不显示SBA。将大鼠的活动录像。这项研究是在9:00至15:00期间完成的，对大鼠来说这不是一个活跃的时间。在这段时间内，未被约束的大鼠多半会睡觉或吃东西。尽可能地排除与进食和饮食有关的咬肌活动。在6小时的束缚应激中，个体SBA从19.77分钟到1.37分钟（0.23-3.30分钟/小时）不等（图2）。平均SBA在此期间为8.06±5.02分钟。

肉眼观察脾脏和胸腺

脾和胸腺明显受到约束应激的影响。与对照组相比，经历6小时约束应激的大鼠的脾脏和胸腺重量显著较低（P = 0.05）（图3）。在组织学和肉眼观察中，观察到相对于对照组，胸腺皮质减少，胸腺骨髓增加以及白脾髓减少（图3）。然而，胸腺和脾脏的重量与SBA持续时间成正比增加; 胸腺（P = 0.032）和脾脏（P = 0.0002）的这种相关性具有统计学意义（图4）。

SBA和血液白细胞

在360分钟的束缚应激中，中性粒细胞的百分比逐渐增加，而淋巴细胞的百分比逐渐减少（图5）。血液白细胞中的嗜中性粒细胞与淋巴细胞的比例在束缚应激的240分钟时反转，并持续至试验结束。相反，SBA减弱了应激诱导的嗜中性粒细胞/淋巴细胞平衡变化（图6）。

SBA，血液肾上腺素和皮质醇水平

束缚应激的大鼠显示相对于对照组大鼠的皮质醇和肾上腺素水平增加（1.20±0.30），尽管这些增加被SBA减弱（图7）。血中肾上腺素水平与血液白细胞中性粒细胞百分比显着相关（R =0.604，P<0.01;图8）。 RAS和中性粒细胞在血液白细胞中的百分比也有很强的相关性（R = 0.835，P<0.01;图8）

SBA和溃疡形成

6小时的束缚应激后，形成各种胃溃疡（图9a）。 SBA持续时间与RAS显着相关（R = -0.6746，P<0.01），表明SBA对应激性溃疡形成有保护作用（图9b）。

结论

        这项研究表明，SBA可减轻应激引起溃疡的发生以及胸腺和脾脏的退行性改变。同时，SBA减少了血液中肾上腺素，皮质醇和嗜中性粒细胞的释放或增加。总之，暴露于应激的情况下，通过SBA，减弱了应激诱发的ANS应答，包括胃溃疡形成。

讨论

        以前的研究证实了咀嚼功能障碍对抑制应激诱导的神经生理反应变化的下调作用。例如，束缚应激时，大鼠下丘脑和室旁核中Fos表达，自由基消耗，磷酸化ERK1/2表达，促肾上腺皮质激素释放因子表达和神经元一氧化氮合酶表达增加。

        本研究是针对SBA而不是人为咬合的效果，并支持如下观念，即情绪状态的变化反映在肌肉紧张，特别是咀嚼肌紧张。

       可以推测，咬合行为将转移压力情境产生的消极情绪（焦虑和/或恐惧），从而减少压力造成不利影响。如果这个假设适用于人类，那么通过像睡眠磨牙症这样的应对机制，可能对减少神经官能症的发生有益，如应激产生的溃疡或神经疾病。

来源：浙一口腔正畸林军